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中壓層析柱的使用方法可能因具體情況而有所不同

更新時(shí)間:2023-11-09      點(diǎn)擊次數(shù):850
  中壓層析柱是一種常用的分離和純化技術(shù),在化學(xué)、生物、制藥等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。以下是中壓層析柱的使用方法:
 
  一、準(zhǔn)備工作:
 
  1.選擇適當(dāng)?shù)纳V填料:根據(jù)分離目標(biāo)選擇合適的色譜填料,如凝膠過濾、離子交換、親和層析等。
 
  2.準(zhǔn)備層析柱:選擇合適的柱子尺寸和材料,并進(jìn)行裝填填料。
 
  二、手動(dòng)裝填填料:
 
  1.準(zhǔn)備填料:將色譜填料充分懸浮在適當(dāng)?shù)娜芤褐?,以獲得均勻的懸浮液。
 
  2.填充柱子:將懸浮液緩慢地注入柱子中,使之自下而上均勻填充。注意避免氣泡和空隙的形成。
 

 

  三、動(dòng)態(tài)裝填填料:
 
  1.使用專業(yè)的層析儀器:利用自動(dòng)層析設(shè)備或液相色譜系統(tǒng)進(jìn)行填充。
 
  2.設(shè)置適當(dāng)?shù)牟僮鲄?shù):根據(jù)填料種類,設(shè)定合適的流速、壓力和梯度等參數(shù)。
 
  四、樣品加載:
 
  1.選擇適當(dāng)?shù)募虞d緩沖液:根據(jù)樣品的特性選擇合適的緩沖液,并進(jìn)行預(yù)處理。
 
  2.注射樣品:使用適當(dāng)?shù)难b置將樣品緩慢地注射到層析柱底部,避免氣泡的產(chǎn)生。
 
  五、層析過程及監(jiān)控:
 
  1.運(yùn)行層析:根據(jù)預(yù)設(shè)的梯度或流速,開始進(jìn)行層析過程。
 
  2.監(jiān)控進(jìn)樣峰和分離峰:通過檢測器(如紫外-可見光譜儀、熒光檢測器等)實(shí)時(shí)監(jiān)控樣品的進(jìn)樣峰和分離峰。
 
  六、柱洗脫:
 
  1.切換洗脫緩沖液:根據(jù)需要,改變洗脫緩沖液的組成,實(shí)現(xiàn)樣品的逐步洗脫。
 
  2.收集洗脫分離物:設(shè)置適當(dāng)時(shí)間間隔,根據(jù)需求收集柱子中洗脫出來的分離物。
 
  七、維護(hù)層析柱:
 
  1.柱子再生:根據(jù)填料和柱子材料的要求,進(jìn)行柱洗脫后的再生處理。
 
  2.儲(chǔ)存柱子:避免柱子干燥和落塵,儲(chǔ)存于干燥的環(huán)境中,使用前進(jìn)行柱平衡。
 
  需要注意的是,中壓層析柱的使用方法可能因具體情況而有所不同,請根據(jù)實(shí)際需求和操作手冊進(jìn)行操作。另外,對(duì)于初次使用層析柱的用戶,最好在專業(yè)人員的指導(dǎo)下進(jìn)行操作,確保安全和準(zhǔn)確性。

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