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3-19
凝膠色譜柱是一種常用的分離技術(shù),廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、生物化學(xué)、藥學(xué)、食品科學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域。它的基本原理是通過凝膠顆粒來實(shí)現(xiàn)樣品分離,凝膠顆粒根據(jù)其物理化學(xué)性質(zhì)選擇性地固定不同的化合物,從而實(shí)現(xiàn)樣品的分離和純化。常見的凝膠材料包括聚丙烯酰胺凝膠(PolyacrylamideGel,簡(jiǎn)稱PA)、瓊脂糖凝膠(AgaroseGel)和硅膠凝膠(SilicaGel)。聚丙烯酰胺凝膠主要應(yīng)用于蛋白質(zhì)、多肽和核酸的分析和純化,瓊脂糖凝膠主要應(yīng)用于大分子多糖、DNA片段的分析和純化,硅膠凝膠主要...
3-2
有機(jī)酸分析柱用于糾正聚合物污染或聚合物床壓縮的可能的操作1.制備新鮮的洗脫液在很多情況下,柱效的喪失會(huì)歸結(jié)為洗脫液的污染。所以,要在使用柱子以前要制備新鮮的洗脫液,沖洗所有液體管路。洗脫液在使用以前,應(yīng)當(dāng)用0.2到0.4微米的濾膜過濾。2.聚合物床的“放松”如果使用了不正確的高流速的話,很多聚合物與硅膠連接會(huì)缺乏硬度而可以被壓縮或坍塌。然而,它們是可以回彈的,在很多情況下,壓縮是可以恢復(fù)的。要修復(fù)坍塌的聚合物床,關(guān)閉泵,使聚合物放松30分鐘。倒轉(zhuǎn)色譜柱,泵入洗脫液,0.1毫升...
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有機(jī)酸分析柱的溫度1.有機(jī)酸分析柱可以在20-90°C使用。提高柱溫會(huì)改善柱效。然而,柱溫也會(huì)樣品的保留,所以建議使用柱溫箱以保證得到可以重復(fù)的結(jié)果。2.由于某些分離對(duì)溫度非常敏感,所以有必要仔細(xì)地操控溫度以優(yōu)化分離效果。如果在室溫使用這個(gè)柱子,洗脫流速必須降低保持泵壓不高于2200PSI。有機(jī)酸分析柱的貯存方法1.有機(jī)酸分析柱提供給你的時(shí)候使用0.01N的硫酸作為平衡。這也是建議的用于貯存的洗脫液。柱子在保存的時(shí)候,一定要使用提供的螺絲和墊圈將端口密封。2.有機(jī)酸分析柱必須...
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有機(jī)酸分析柱柱效喪失的原因有很多,下面我們就列舉幾個(gè)常見的原因供大家參考。具體請(qǐng)以實(shí)際情況來判斷。有機(jī)酸分析柱柱效喪失的常見原因1.聚合物污染。2.不正確的柱溫。3.不正確的洗脫流速。4.不正常的陽離子(如Na+或H+)。5.洗脫液的pH或離子強(qiáng)度不正確。6.在開始洗脫的時(shí)候,平衡時(shí)間不夠。1.額外的峰展寬。要保證管路的長(zhǎng)度和內(nèi)徑都保持zui小。a.高柱壓伴隨柱效降低。1.顆粒物積聚在燒結(jié)物或者聚合物床上。(a)樣品來源---過濾或離心(b)洗脫液來源---過濾洗脫液,封閉洗...
12-21
乳制品牛乳中乳糖含量測(cè)定分析1.介紹乳糖是兒童生長(zhǎng)發(fā)育的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之一,對(duì)青少年智力發(fā)育十分重要,特別是新生嬰兒*的,在自然界中只有哺乳類動(dòng)物的奶中含有乳糖,各類植物性食物中是不含乳糖的。一分子乳糖消化可得一分子葡萄糖和一分子半乳糖。半乳糖能促進(jìn)腦苷脂類和黏多糖類的生成,因而對(duì)幼兒智力發(fā)育非常重要。乳制品企業(yè)通常通過測(cè)定牛乳中半乳糖的含量來計(jì)算牛乳中乳糖的含量。2.實(shí)驗(yàn)設(shè)備:ELSD3300蒸發(fā)光散射檢測(cè)器Agilent1260HPLC,C.01.07試劑及耗材:流動(dòng)相A:...
12-15
Alltech色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70kg/cm2時(shí),也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應(yīng),不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度,其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細(xì)管柱。Alltech色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板,是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金,孔徑0.2~20µm(5~10µm),取決于填料...
12-5
Alltech色譜柱裝填有固定相用以分離混合組分的柱管。Alltech色譜柱多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等形狀。Alltech色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類。液相色譜通常均采用填充柱。Alltech色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相,以及色譜柱的制備和操作條件。色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對(duì)色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化...
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